Antikorp Brucella Kit ELISA

Speċifikazzjoni

 

Proċeduri u Interpretazzjoni tat-Test

 

Pass 1 Proċedura tat-Test

1.1 Preparazzjoni tas-soluzzjoni tal-ħasil

Wkonċentrazzjoni tal-orking wLikwidu tal-Assistenza:Qabel l-użu, is-soluzzjoni tal-ħasil għandha tiġi rrestawrata għat-temperatura tal-kamra (20-25 grad) u titħawwad indaqs biex tagħmilha uniformi. Imbagħad iddilwixxi 20 darba s-soluzzjoni tal-ħasil ikkonċentrata b'ilma purifikat (per eżempju, 5ml soluzzjoni tal-ħasil ikkonċentrata hija miżjuda ma '95ml ilma purifikat), ħawwad sewwa, u l-likwidu tal-ħasil dilwit jista' jinħażen fi 2-8 grad għal 7 ijiem.

1.2 Preparazzjoni tal-kampjun

Id-demm tal-annimali whole ttieħed, iċċentrifugat f'4000rpm għal 10 minuti, u nġabar supernatant. Is-serum jista 'wkoll jiġi koagulat b'mod naturali mingħajr emolisi.

② Meta d-daqs tal-kampjun huwa kbir, sabiex jiġi żgurat li l-ħin ta 'reazzjoni sperimentali jkun konsistenti. Ħallat il-kampjun tas-serum mas-soluzzjoni tax-xogħol tal-antikorpi f'1: 1 fil-pjanċa tad-dilwizzjoni (70UL Kampjun tas-serum + 70 UL Soluzzjoni ta 'ħidma għall-antikorpi). Il-kontroll negattiv u l-kontroll pożittiv huma l-istess bħall-kampjun tas-serum.

1.3 Proċedura tat-Test

①Take Il-microplate tat-tikketta tal-enzima (skont in-numru ta 'kampjuni, tista' tiġi żarmata u użata diversi drabi), waqqaf żewġ bjar kull wieħed għal kontrolli negattivi u pożittivi, żid 100UL tat-taħlita mħallta minn qabel mat-tikketta tal-enzima microplate. Ħawwad bil-mod il-kampjun fil-bir, billi tuża l-film tal-pjanċa tas-siġillar biex tkopri l-pjanċa, u inkuba f'37 grad għal 30 minuta.

②Open il-film tal-pjanċa tas-siġillar, ħawwad sew is-soluzzjoni fil-pjanċa, żid 300 µl ta 'konċentrazzjoni ta' ħidma ta 'likwidu ta' konċentrazzjoni ma 'kull bir, u mbagħad armi l-likwidu fil-bir. Irrepeti l-passi ta 'hawn fuq 5 darbiet, u fl-aħħar nixxef fuq karta assorbenti nadifa.

③DConjugate ta 'l-enzima mdaħħla:Iddilwixxi l-konjugat tal-enzima (50 ×) 50 darba (per eżempju: 20UL enzima konjugata konjugata + 980 UL Dilwent 1, l-ammont speċifiku meħtieġ huwa kkalkulat skont in-numru ta 'kampjuni tat-test), ħawwad sewwa u mwarrab.

④add 100µl ta 'enzima konjugata għal kull bir, għatti l-pjanċa, u inkuba f'37 grad għal 30 minuta.

Il-pjanċa tal-enzima tal-ħasil, l-operazzjoni speċifika hija l-istess bħal hawn fuq ②.

⑥add 100 µl ta 'soluzzjoni ta' substrat għal kull bir, għatti l-pjanċa u inkuba għal 10 minuti f'37 grad 'il bogħod mid-dawl.

⑦add 50 µl ta 'waqfien ta' soluzzjoni għal kull bir, u ddetermina r-riżultat fi żmien 5 minuti.

 

Pass 2 Interpretazzjoni tar-Riżultat

 

Il-valur OD450 ta 'kull bir inqara fuq il-qarrej tal-microplate 96-.

2.1 Validazzjoni

 

Il-valur medju OD45 0 NM ta 'kontroll pożittiv kien <0.35 u l-valur medju OD450NM ta' kontroll negattiv / kontroll pożittiv kien ikbar minn jew daqs 3.5, ir-riżultati sperimentali kienu validi. Inkella, it-test għandu jkun ripetut.

2.2 Metodu ta 'kalkolu

Għal kull kampjun, ikkalkula l-PI (BlockingR ate) kif ġej bl-użu tal-kampjun ikkoreġut u l-valuri tal-kontroll:

2.3 Interpretazzjoni tar-Riżultati

Meta PI <20%, huwa ġġudikat bħala negattiv.

Meta PI> 30%, huwa ġġudikat bħala pożittiv.

Meta 20% inqas minn jew daqs Pi inqas minn jew daqs 30%, huwa ġġudikat bħala suspettuż, u jissuġġerixxi li jirrepeti t-teħid ta 'kampjuni u jittestja ġimgħa wara.

It-tags Popolari: Antikorp Brucella Kit ELISA, China Brucella Antikorp ELISA Fornituri, Manifatturi, Fabbrika